Naukowcy starają się zoptymalizować wnioski przedkliniczne, minimalizując jednocześnie wykorzystywanie zwierząt, często sięgając po psy i zwierzęta domowe ze względu na ich wielkość i znaczenie fizjologiczne. Jednak poruszanie się wśród złożoności badań i rozbieżności fizjologicznych, szczególnie w przypadku makaków i beagli, wiąże się z wyjątkowymi wyzwaniami. Oto najważniejsze kwestie:
1.Dane przed-próbką:
Regularne-przedprocesowe gromadzenie danych pomaga w śledzeniu zmian w czasie, ułatwia dostosowywanie się do procedur i identyfikowanie nieprawidłowych warunków zdrowotnych. Parametry takie jak liczba czerwonych krwinek (RBC), liczba neutrofili i aktywność enzymów wątrobowych służą jako istotne wskaźniki. Wykluczanie zwierząt o nieprawidłowych parametrach poprawia interpretację danych.
2. Zmienne projektu próby:
Pobieranie krwi do badań farmakokinetyki/farmakodynamiki (PK/PD) jest powszechne, ale może mieć wpływ na takie parametry, jak liczba czerwonych krwinek i aktywność enzymów mięśniowych. Utrzymanie standardowych warunków podczas pobierania próbek jest koniecznością. Zmienne takie jak wiek zwierzęcia, post i droga podania również wpływają na interpretację danych.
3. Czerwone krwinki:
Psy i makaki mają dłuższą żywotność czerwonych krwinek w porównaniu do gryzoni. Regionalne różnice w liczbie czerwonych krwinek makaków{{1}żerujących kraby wpływają na zliczanie, natomiast czynniki takie jak aktywność śledziony i średnie stężenie hemoglobiny w krwince komórkowej (MCHC) wpływają na interpretację danych i kryteria wykluczenia.
4. Białe krwinki:
Neutrofile i limfocyty dominują w liczbie białych krwinek we krwi obwodowej u różnych gatunków, ale proporcje te znacznie się różnią. Psy zazwyczaj wykazują wyższą liczbę neutrofili (50-75% białych krwinek) w porównaniu do makaków (25-50%), która i tak przewyższa gryzonie. Silniejsza reakcja zapalna, w której pośredniczą neutrofile u psów i makaków, stwarza wyzwania w interpretacji zmian związanych z substancjami testowymi ze względu na ograniczoną liczbę zwierząt i czynniki zakłócające, takie jak leukocytoza wywołana stresem. Przejściowa limfocytoza u zdrowych makaków może w większości przypadków wskazywać na infekcję wirusową.
5. Koagulacja:
Psy mają najkrótszy czas protrombinowy (PT), co wymaga dużej czułości analizatorów krzepnięcia. Niektórym beagle brakuje czynnika krzepnięcia VII, nieznacznie wydłużającego się PT, wykrywalnego w-danych przedpróbowych. Zakres czasu częściowej tromboplastyny aktywowanej u makaków (APTT) może się podwoić w przypadku różnych partii odczynników, co komplikuje interpretację. Odstępstwa od standardowych procedur wymagają uwagi.
http://www.prisysbiotech.com/nhp-farmakologia/koagulacja-hemostaza-nonhuman-primates.html
6. Funkcja wątroby:
Aminotransferaza alaninowa (ALT) pozostaje kluczowa w wykrywaniu uszkodzeń hepatocytów. Psy wykazują wąskie zakresy ALT (25-40 IU/l), co pozwala na czułe wykrywanie zmian wywołanych przez badane substancje. Zakresy ALT u makaków są szersze i zależą od wieku i często subklinicznego zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu A. Przejściowe podwyższenie aktywności AlAT po-infekcji może skomplikować interpretację. Fosfataza alkaliczna (ALP) jest wrażliwa na problemy z żółcią u psów, ale nie u makaków. Transferaza gamma-glutamylowa (-GT) jest bardziej wrażliwa i specyficzna u makaków. Oznaczenie bilirubiny całkowitej u obu gatunków nie jest wiarygodne.
7. Funkcja nerek:
Poziomy mocznika i kreatyniny u młodych psów rasy beagle są wąskie, co czyni je czułymi wskaźnikami wpływu na nerki w badaniach przedklinicznych. Jednak różnice w makakach są szersze. Analiza moczu zapewnia ograniczone informacje ze względu na wyzwania związane z pobieraniem próbek od niechętnych do współpracy zwierząt. Ulepszone techniki, takie jak cewnikowanie, mogą poprawić jakość próbki.
8. Uraz mięśni:
Ocena uszkodzenia mięśni jest łatwiejsza u psów niż u makaków. Przypadkowe urazy podczas zabiegów są częste u makaków, co znajduje odzwierciedlenie w zmianach aktywności kinazy kreatynowej (CK). Troponiny sercowe są lepszymi markerami uszkodzenia mięśnia sercowego u obu gatunków, przewyższając izoenzymy.
9. Węglowodany, białka i lipidy:
Poziom glukozy we krwi makaków jest zazwyczaj niższy, ale może wzrosnąć z powodu stresu podczas zbierania. Wysoki poziom może wskazywać na cukrzycę i wymagać ponownej oceny. Makaki mają wyższe całkowite stężenie białka i globulin, które podlega znacznym wahaniom. Podwyższona globulina może sugerować stan zapalny lub infekcję.
10. Substancje nieorganiczne i elektrolity:
Różnice w zawartości wapnia i fosforanów u makaków są większe niż u psów. Stężenia elektrolitów u makaków mogą się znacznie różnić, a czasami obserwuje się wysokie poziomy. Ogólnie rzecz biorąc, parametry te zapewniają cenny wgląd w funkcjonowanie narządów i potencjalny wpływ substancji testowych w badaniach przedklinicznych.
Wniosek:
Na interpretację danych dotyczących patologii klinicznej uzyskanych w badaniach z udziałem psów i makaków wpływa wiele czynników, w tym mała wielkość próby, zmienność osobnicza zwierząt i inne czynniki-związane z badaniem. Chociaż różnice populacyjne pozostają istotne, indywidualne różnice między zwierzętami mogą mieć większe znaczenie orientacyjne. Właściwa interpretacja danych dotyczących patologii klinicznej wymaga dokładnej oceny wszystkich dostępnych danych, zrozumienia charakterystyki gatunkowej i uwzględnienia wpływu różnych zmiennych projektu badania.
