Ze względu na złożoną i zróżnicowaną strukturę ADC, a także niskie stężenie uwalnianych-leków drobnocząsteczkowych w próbkach biologicznych,farmakokinetyka (PK)ocena stwarza kilka wyzwań. Wyzwania te dotyczą przede wszystkim charakterystyki PK, korelacji PK-PD, analitów docelowych, metodologii bioanalitycznych i interpretacji danych.
Projekt badania PK i wybór gatunków dla ADC
Biorąc pod uwagę specyfikę ADC, zaleca się przeprowadzenie badań farmakokinetycznych po podaniu pojedynczej-dawki i wielokrotnej-dawki u odpowiednich gatunków zwierząt. Jeśli gryzonie nie mają znaczenia farmakologicznego lub istotne są tylko gatunki inne niż-gryzonie, badania PK można ograniczyć do gatunków innych niż-gryzonie. Różnice w farmakokinezji-międzygatunkowej mogą znacząco wpłynąć na przewidywania odpowiedzi na dawkę w badaniach toksykologicznych, a ocena farmakokinetyki każdego ADC powinna odbywać się według indywidualnego podejścia-po-przypadku w oparciu o jego charakterystykę. Skład, stężenie i sposób podawania ADC powinny być jak najbardziej zbliżone do tych stosowanych w toksykologii lub badaniach klinicznych, z potwierdzeniem stężenia podawanej postaci podczas badań.
Kluczowe anality i parametry ADC PK
Typowe analityki do profilowania ADC PK obejmują:
- Nienaruszone ADC i/lub całkowite przeciwciało(zarówno sprzężone, jak i niesprzężone).
- Bezpłatny lek drobno-cząsteczkowyi/lub nagie przeciwciało (jeśli ADC konkuruje z przeciwciałem wiążącym się z celem, to wykrycie również staje się znaczące).
Podstawowe badania PK dla ADC oceniają stabilność ADC, krzywą stężenia w osoczu-w czasie,wchłanianie, dystrybucja, metabolizm i wydalanie (ADME). W przypadku nowych małych cząsteczek wskazane jest połączenie metodologii in vivo i in vitro w celu ilościowego określenia narażenia układu, wiązania z białkami osocza i charakterystyki wydalania. Należy również zbadać dystrybucję do nowotworów i prawidłowych tkanek. Może być wymagana kompleksowa ocena-małocząsteczkowych metabolitów leku, obejmująca narażenie na działanie układu, profilowanie metabolitów i drogi usuwania.
Mechanizmy metabolizmu i wydalania ADC
Podstawowe mechanizmy eliminacji ADC obejmują dwie ścieżki:
- Odsprzęganie– rozszczepienie łącznika uwalnia lek-małocząsteczkowy, zachowując jednocześnie szkielet przeciwciała.
- Rozkład– degradacja przeciwciał do peptydów/aminokwasów i uwolnienie wolnych lub połączonych toksyn drobnocząsteczkowych-.
Zmniejszenie stężenia ADC in vivo następuje głównie w wyniku degradacji enzymatycznej i oddzielenia małocząsteczkowych-leków. Różne szybkości klirensu pomiędzy całkowitym przeciwciałem i ADC odzwierciedlają stabilność ADC in vivo i pośrednio zapewniają wgląd w stabilność łącznika i szybkości uwalniania ładunku. Ponadto badania PK ADC korzystają z ocen immunogenności w celu monitorowania odpowiedzi przeciwciał anty-ADC (ATA), które przyczyniają się do klirensu ADC i mogą wpływać na skuteczność terapeutyczną i bezpieczeństwo.
Dystrybucja ADC i znaczenie kliniczne
Rozkład ADC in vivo zazwyczaj przypomina rozkład nieskoniugowanego przeciwciała, ponieważ przeciwciała w dużej mierze determinują strukturę ADC. Początkowo ograniczone do krwiobiegu, ADC wykazują ograniczoną penetrację tkanek, ale mają tendencję do gromadzenia się w narządach o wysokim-krwi-przepływie (np. wątrobie, nerkach). Biodystrybucja ADC zależy od ekspresji docelowego antygenu i szybkości internalizacji komórkowej. Leki ADC mogą gromadzić się w tkankach docelowych i nie-docelowych, powodując potencjalne skutki farmakologiczne lub toksykologiczne w wyniku późniejszego uwolnienia ładunków cytotoksycznych.
Zrozumienie biodystrybucji ADC jest niezbędne do skorelowania jego profilu farmakologicznego i toksykologicznego, wspierania zoptymalizowanego projektu ADC i kierowania ocenami bezpieczeństwa klinicznego.
Połączone podejścia w badaniach ADC PK
Złożoność ADC PK wymaga połączonego podejścia z wykorzystaniem in vivo, in vitro,zwierzęi badania ludzkie. Zintegrowane podejścia-takie jak badania stabilności pomiędzy gatunkami i docelowymi-liniami komórkowymi, w których zachodzi ekspresja-, wyjaśniają metabolizm ADC, pomagają w identyfikacji metabolitów i ustalają znaczenie przedkliniczne. Na przykład w przypadku rozwoju T-DM1 badania metabolizmu ADC i DM1 na szczurach dostarczyły podstawowych danych do badań na ludziach i podkreśliły znaczenie monitorowania interakcji leków-lek (DDI), gdy ADC są-podawane jednocześnie z inhibitorami CYP3A4/5.
