Testy immunogennościsą niezbędne w opracowywaniu leków klinicznych, szczególnie w przypadku produktów bioterapeutycznych. Pomimo skupienia się organów regulacyjnych na wymogach klinicznych, w określonych okolicznościach niekliniczna ocena immunogenności pozostaje kluczowa. Zgodnie z ICH S6 niekliniczną immunogenność należy oceniać w przypadku znaczących zmian w działaniu farmakodynamicznym lub w przypadku zmiany ekspozycji na lek bez markerów farmakodynamicznych lub wskaźników odpowiedzi immunologicznej.
Minimalny konsensus strategiczny Europejskiego Forum Bioanalizy (EBF)
W 2016 r. EBF powołała grupę roboczą, w wyniku której osiągnięto konsensus w sprawie minimalnych strategii nieklinicznej oceny immunogenności. Kluczowe parametry obejmują ocenę SCP, czułość, tolerancję na lek i precyzję:
1. Wartości-odcięcia:W przypadku progów przesiewowych zaleca się odsetek wyników fałszywie dodatnich (FPR) wynoszący 0,1-1% bez badań potwierdzających. FPR na poziomie 0,1% pomaga wykluczyć wyniki fałszywie dodatnie w pobliżu sygnału SCP, skutecznie wykrywając istotne niekliniczne odpowiedzi immunologiczne. Zgodnie z zasadą 3R, SCP można określić przy użyciu mniejszej liczby pojedynczych próbek, najlepiej 15–30, co daje 60 punktów danych (np. 30 próbek analizowanych dwukrotnie lub 15 próbek analizowanych czterokrotnie). Potwierdzenie FPR próbki przed dawkowaniem nie jest konieczne ze względu na jego ograniczone znaczenie niekliniczne.
2. Czułość:Czułość należy ocenić w ramach pojedynczej partii analitycznej. Idealnie MRD powinno wynosić poniżej 100, a czułość poniżej 1000 ng/ml. Zgodnie z wytycznymi NMPA 2021 czułość powinna osiągać 250–500 ng/ml, przy czym preferowana jest czułość poniżej 100 ng/ml, jeśli jest to osiągalne. Stężenie LPC można ustawić w pobliżu 2-3-krotności sygnału SCP bez obszernej analizy statystycznej.
3. Precyzja:Precyzję należy ocenić w trzech seriach analitycznych, z których każda zawiera sześć zestawów niezależnie przygotowanych kontroli dodatnich na trzech poziomach stężeń (HPC, MPC, LPC) i sześć zestawów kontroli ujemnych (NC).
4. Poziomy tolerancji na leki:Tolerancję leku należy oceniać na poziomie LPC (lub kontroli pozytywnej 1000 ng/ml), aby upewnić się, że metoda może wykryć ADA przy oczekiwanych poziomach leku w badaniach nieklinicznych.
Opcjonalne parametry walidacyjne obejmują selektywność, swoistość, miana i stabilność, dostosowane do indywidualnych potrzeb projektu.
Sprostanie wyzwaniom branży
„Strategia minimum” wiąże się z praktycznymi wyzwaniami związanymi z wdrażaniem, szczególnie ze względu na długotrwałe poleganie branży na wytycznych klinicznych w przypadku nieklinicznych badań immunogenności. Na przykład branża często waha się przed przyjęciem strategii takich jak „tylko badanie przesiewowe przy współczynniku FPR 0,1-1% bez testów potwierdzających”. Niemniej jednak określenie wartości odcięcia, czułości, tolerancji na lek i precyzji pozostaje kluczowe.
Zalecenia dotyczące nieklinicznych testów immunogenności
Biorąc pod uwagę stwierdzony brak możliwości przełożenia danych nieklinicznych i klinicznych, EBF zaleca, co następuje:
1. Ocena przypadku-po-:Ocena nieklinicznych-przeciwciał przeciwlekowych (ADA) powinna opierać się na przesłankach naukowych i użyteczności danych, a nie być wymogiem domyślnym.
2. Badania farmakokinetyczne/farmakodynamiczne (PK/PD):Badania te, przeprowadzone przed toksykologią GLP, mogą dostarczyć wiedzy na temat odpowiedzi immunologicznych, ale mają ograniczoną wartość.
3. Badania toksykologiczne:Podstawowym celem jest wykazanie wystarczającej ekspozycji oraz ocena wynikających z niej patologii i ich odwracalności, określenie poziomów braku skutków i marginesów bezpieczeństwa do użytku klinicznego. ADA może, ale nie musi, wpływać na TK/PD lub powodować obserwowane patologie.
4. Podejmowanie decyzji:Prawdopodobieństwo wygenerowania odpowiedzi immunologicznej in vivo powinno kierować działaniami związanymi z opracowywaniem testów, równoważąc ryzyko biznesowe i harmonogram sponsora.
Podejścia dotyczące strategii immunogenności:
- Gromadź próbki i opracowuj/waliduj testy tylko w przypadku zaobserwowania wpływu TK/PD i bezpieczeństwa.
- Opracuj testy i rozpocznij walidację/testowanie na podstawie zaobserwowanego wpływu na TK/PD i bezpieczeństwo.
- Aktywnie opracowuj i weryfikuj testy w oparciu o ryzyko biznesowe i zasoby.
Do walidacji testu można zastosować oszczędne podejście, unikając pełnych wymagań testów klinicznych i stosując zasady 3R. Do analizy próbki wystarczą testy przesiewowe z rygorystycznymi punktami odcięcia (0,1–1% FPR) lub podejściem sygnał/szum.
Przyjmując te zoptymalizowane strategie, niekliniczna ocena immunogenności może stać się skuteczniejsza i zgodna z oczekiwaniami naukowymi i regulacyjnymi, co ostatecznie usprawni rozwój produktów bioterapeutycznych.
